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酶標儀測定黃曲霉毒素的原理是什么?-山東云唐智能科技有限公司

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酶標儀測定黃曲霉毒素的原理是什么?

發布者:超級管理員 2025-03-12

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        酶標儀測定黃曲霉毒素主要基于酶聯免疫吸附測定(ELISA)的原理,這是一種將抗原抗體反應的特異性和酶的**催化作用相結合的分析技術,具體原理如下:

        抗原抗體特異性結合:在黃曲霉毒素的檢測中,首先將黃曲霉毒素的抗原包被在微孔板的表面。當加入含有黃曲霉毒素(待測抗原)的樣品和一定量的酶標記抗體(酶與抗黃曲霉毒素抗體結合形成的復合物)時,樣品中的黃曲霉毒素和包被在微孔板上的抗原會競爭結合酶標記抗體上的特異性結合位點。也就是說,樣品中黃曲霉毒素含量越高,與酶標記抗體結合的量就越多,那么能與包被抗原結合的酶標記抗體就越少;反之,樣品中黃曲霉毒素含量越低,與包被抗原結合的酶標記抗體就越多。

        酶的催化作用:在抗原抗體反應完成并經過洗滌步驟去除未結合的物質后,加入酶的底物。此時,結合在微孔板上的酶標記抗體中的酶(如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等)會催化底物發生化學反應,生成有色產物。酶具有**的催化活性,少量的酶就能催化大量的底物轉化為產物,而且酶促反應的程度與結合在微孔板上的酶標記抗體的量成正比。

        吸光度與黃曲霉毒素含量的關系:生成的有色產物在特定波長下具有一定的吸光度,使用酶標儀在相應波長(如辣根過氧化物酶常用 450nm 波長)下測定微孔板中溶液的吸光度值。由于吸光度值與結合在微孔板上的酶標記抗體的量成正比,而酶標記抗體的結合量又與樣品中黃曲霉毒素的含量成反比,所以*終測得的吸光度值與樣品中黃曲霉毒素的含量呈負相關關系。通過測定一系列已知濃度的黃曲霉毒素標準品的吸光度值,繪制出標準曲線,再根據樣品的吸光度值從標準曲線上計算出樣品中黃曲霉毒素的含量。

        簡而言之,酶標儀測定黃曲霉毒素是利用抗原抗體的特異性結合以及酶對底物的催化顯色反應,通過檢測吸光度值來間接反映樣品中黃曲霉毒素的含量。

        

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